Odyssey成像系统特点
定量精确
直接的荧光检测是Odyssey具有卓越的定量精确性的关键。检测过程中,激光激发红外染料标记的抗体发出荧光,荧光信号
强度和蛋白丰度具有极好的线性相关性。而基于酶促反应的化学发光法在一定时间内只有部分底物发生反应,其定量的精
确性十分依赖于起始时间和曝光时间,其检测易受到诸多因素的影响而导致定量不准确。
直接检测
杂交以后直接扫描成像,无需胶片、暗房或复杂的染色及显色过程,大大节约实验时间和试剂成本,实验效率得到
大幅度的提高。
双色成像
可用两种不同波长的红外染料对不同的生物分子(蛋白或核酸)标记和同时检测,杂交检测条件均等,数据对比性强,结
果直观。两种染料的最大发射波长相差100nm,无光谱重叠,因此可用于进行两种信号间精确的量化分析。
清晰的成像结果
Odyssey红外检测方法有效消除了膜、孔板等介质的自身背景荧光,可以得到清晰、锐利的条带。一次杂交中强带和弱带都
可清晰成像,可以避免化学发光产生的强信号条带曝光过度或严重的扩散现象(smear)及多重曝光的定量不确定性。
高灵敏度
针对Western blot,Odyssey是唯一灵敏度可达到皮克级(pg)的荧光系统,其检测效果等于或优于化学发光法。
功能强大的软件系统
Odyssey软件提供多种界面友好、功能完善的分析工具,可快速判定样品分子量大小并进行定量分析。
Odyssey在蛋白、分子成像研究中的应用
使用Odyssey无需使用其他标记方法如化学发光或同位素技术就可以得到足够的灵敏度,红外染料可以得到清晰锐利
的图像结果,具有广泛的应用范围:
双色Western Blot—蛋白磷酸化修饰研究
Odyssey双色红外激光成像系统是蛋白Western Blot检测的最佳选择,不仅因为Odyssey系统具有相当高的灵敏度和最
佳的定量精确性,还因为该系统具有双通道检测功能,这对于蛋白翻译后的修饰过程研究非常有效。
蛋白的研究不仅需要量化,修饰化研究更是一项重要内容。Odyssey系统的双色功能极大方便了针对蛋白的不同修
饰、剪切变化的研究。同时使用两种红外染料,标记两种抗体同时分析两个靶分子,这项技术是化学发光和同位素方法难
以实现的。
在一张印记杂交膜上的双色Western Blot蛋白分析,会得到更快更准确地蛋白磷酸化(或其它修饰化)的检测结果,
排除了由于分别两次实验造成的分析结果误差。高清晰的成像也使得发现由于蛋白修饰而引起的迁移率漂移变得更加容
易。
双色WB检测的优越性:
• 双色输出,两个靶分子同时检测,工作量降低,而且均等的杂交条件,便于两个数据的比较
• 杂交结果对比输出,结论更加直观,结果一目了然
• 可进行准确的量化分析
微孔板In-Cell Western(ICW)分析
利用Odyssey双色红外激光成像系统进行的ICW是高通量信号传导通路分析和药物筛选的最佳选择。Odyssey可以直接对96或384孔板内的细胞内蛋白进行精确的定量检测。ICW使用红外染料标记的二抗直接标记细胞内蛋白,量化微孔板每个孔内的荧光信号。不仅节约时间,
提高检测效率,还避免了传统Western Blot易出错的操作步骤,例如裂解细胞、凝胶电泳和转膜等。
ICW的优点
• 双通道同时检测,可对两个目标样本的修饰状况如磷酸化进行精确定量检测
• 红外染料结合的探针,提高了检测灵敏度,可实现对蛋白数量或修饰化程度微小变化的检测
• 直接检测细胞内蛋白,避免细胞裂解过程中蛋白的损失以及人工物质的干扰
• 快速,直接在微孔板上检测,无需传统的Western Blot的复杂流程
• 高通量,是检测细胞处理效果和候选药物对靶蛋白的作用效果的理想检测方法
Odyssey ICW软件可用来扫描微孔板、样品定位、精确定量以及数据分析。每个检测通道的荧光图像可独立显示,并采用不同颜色(红色和绿色)。当两个图像相互重叠时,通过颜色的变化可计算蛋白的修饰化程度。
双色EMSA 研究蛋白-DNA间的互作分析
电泳迁移率变化分析(EMSA)是分析蛋白-DNA相互作用最常用的方法。用IRDyes标记DNA片段使得做EMSA 不需要使用
放射性同位素。低至 fmol量的末端标记的DNA可被检测到,检测线性范围可达50倍,从9.1fmol到0.18fmol。除了研究蛋
白-DNA之间的结合分析(如鉴定启动子结合位点)以外,用IRDye 700(red)和IRDye 800(green)分别标记不同的DNA片
段,能够在同一个反应中直接比较蛋白与不同DNA片段之间的竞争性结合分析。Odyssey 可以直接在凝胶上进行两个DNA片
段的分析,不需要印迹到膜上,方便、快捷、无放射性危险。
双色In-Gel Western
Odyssey系统可直接检测凝胶上的蛋白分子,红外检测可得到比化学发光法更清晰锐利的条带,灵敏度也更高。该方法
适用于大分子量蛋白的Western Blot检测。
OdysseyMouse POD活体动物成像模块
基于红外技术,LI-COR在Odyssey平台上推出专业的活体动物成像模块MousePOD及其分析软件。利用红外波长区域内的
激光检测时生物体自身背景荧光低、目标信号灵敏度高,信号穿透力强,通过将结合有IRDye800CW红外染料的探针注入小
动物体内,探针特异性的结合到活体内的目标区域,激光激发后,扫描检测荧光信号并计算其强度,从而研究蛋白在活体
内的定位和功能。
红外活体检测技术具有穿透力强、背景低、灵敏度高的特点,是未来生物活体检测的主流方向
定量精确
直接的荧光检测是Odyssey具有卓越的定量精确性的关键。检测过程中,激光激发红外染料标记的抗体发出荧光,荧光信号
强度和蛋白丰度具有极好的线性相关性。而基于酶促反应的化学发光法在一定时间内只有部分底物发生反应,其定量的精
确性十分依赖于起始时间和曝光时间,其检测易受到诸多因素的影响而导致定量不准确。
直接检测
杂交以后直接扫描成像,无需胶片、暗房或复杂的染色及显色过程,大大节约实验时间和试剂成本,实验效率得到
大幅度的提高。
双色成像
可用两种不同波长的红外染料对不同的生物分子(蛋白或核酸)标记和同时检测,杂交检测条件均等,数据对比性强,结
果直观。两种染料的最大发射波长相差100nm,无光谱重叠,因此可用于进行两种信号间精确的量化分析。
清晰的成像结果
Odyssey红外检测方法有效消除了膜、孔板等介质的自身背景荧光,可以得到清晰、锐利的条带。一次杂交中强带和弱带都
可清晰成像,可以避免化学发光产生的强信号条带曝光过度或严重的扩散现象(smear)及多重曝光的定量不确定性。
高灵敏度
针对Western blot,Odyssey是唯一灵敏度可达到皮克级(pg)的荧光系统,其检测效果等于或优于化学发光法。
功能强大的软件系统
Odyssey软件提供多种界面友好、功能完善的分析工具,可快速判定样品分子量大小并进行定量分析。
Odyssey在蛋白、分子成像研究中的应用
使用Odyssey无需使用其他标记方法如化学发光或同位素技术就可以得到足够的灵敏度,红外染料可以得到清晰锐利
的图像结果,具有广泛的应用范围:
双色Western Blot—蛋白磷酸化修饰研究
Odyssey双色红外激光成像系统是蛋白Western Blot检测的最佳选择,不仅因为Odyssey系统具有相当高的灵敏度和最
佳的定量精确性,还因为该系统具有双通道检测功能,这对于蛋白翻译后的修饰过程研究非常有效。
蛋白的研究不仅需要量化,修饰化研究更是一项重要内容。Odyssey系统的双色功能极大方便了针对蛋白的不同修
饰、剪切变化的研究。同时使用两种红外染料,标记两种抗体同时分析两个靶分子,这项技术是化学发光和同位素方法难
以实现的。
在一张印记杂交膜上的双色Western Blot蛋白分析,会得到更快更准确地蛋白磷酸化(或其它修饰化)的检测结果,
排除了由于分别两次实验造成的分析结果误差。高清晰的成像也使得发现由于蛋白修饰而引起的迁移率漂移变得更加容
易。
双色WB检测的优越性:
• 双色输出,两个靶分子同时检测,工作量降低,而且均等的杂交条件,便于两个数据的比较
• 杂交结果对比输出,结论更加直观,结果一目了然
• 可进行准确的量化分析
微孔板In-Cell Western(ICW)分析
利用Odyssey双色红外激光成像系统进行的ICW是高通量信号传导通路分析和药物筛选的最佳选择。Odyssey可以直接对96或384孔板内的细胞内蛋白进行精确的定量检测。ICW使用红外染料标记的二抗直接标记细胞内蛋白,量化微孔板每个孔内的荧光信号。不仅节约时间,
提高检测效率,还避免了传统Western Blot易出错的操作步骤,例如裂解细胞、凝胶电泳和转膜等。
ICW的优点
• 双通道同时检测,可对两个目标样本的修饰状况如磷酸化进行精确定量检测
• 红外染料结合的探针,提高了检测灵敏度,可实现对蛋白数量或修饰化程度微小变化的检测
• 直接检测细胞内蛋白,避免细胞裂解过程中蛋白的损失以及人工物质的干扰
• 快速,直接在微孔板上检测,无需传统的Western Blot的复杂流程
• 高通量,是检测细胞处理效果和候选药物对靶蛋白的作用效果的理想检测方法
Odyssey ICW软件可用来扫描微孔板、样品定位、精确定量以及数据分析。每个检测通道的荧光图像可独立显示,并采用不同颜色(红色和绿色)。当两个图像相互重叠时,通过颜色的变化可计算蛋白的修饰化程度。
双色EMSA 研究蛋白-DNA间的互作分析
电泳迁移率变化分析(EMSA)是分析蛋白-DNA相互作用最常用的方法。用IRDyes标记DNA片段使得做EMSA 不需要使用
放射性同位素。低至 fmol量的末端标记的DNA可被检测到,检测线性范围可达50倍,从9.1fmol到0.18fmol。除了研究蛋
白-DNA之间的结合分析(如鉴定启动子结合位点)以外,用IRDye 700(red)和IRDye 800(green)分别标记不同的DNA片
段,能够在同一个反应中直接比较蛋白与不同DNA片段之间的竞争性结合分析。Odyssey 可以直接在凝胶上进行两个DNA片
段的分析,不需要印迹到膜上,方便、快捷、无放射性危险。
双色In-Gel Western
Odyssey系统可直接检测凝胶上的蛋白分子,红外检测可得到比化学发光法更清晰锐利的条带,灵敏度也更高。该方法
适用于大分子量蛋白的Western Blot检测。
OdysseyMouse POD活体动物成像模块
基于红外技术,LI-COR在Odyssey平台上推出专业的活体动物成像模块MousePOD及其分析软件。利用红外波长区域内的
激光检测时生物体自身背景荧光低、目标信号灵敏度高,信号穿透力强,通过将结合有IRDye800CW红外染料的探针注入小
动物体内,探针特异性的结合到活体内的目标区域,激光激发后,扫描检测荧光信号并计算其强度,从而研究蛋白在活体
内的定位和功能。
红外活体检测技术具有穿透力强、背景低、灵敏度高的特点,是未来生物活体检测的主流方向
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